細(xì)胞技術(shù)專題：腫瘤細(xì)胞的軟瓊脂集落培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)
更新時(shí)間：2014-02-20 瀏覽次數(shù)：1627
標(biāo)簽： 腫瘤 軟瓊脂 集落
在體外培養(yǎng)基中由一個(gè)祖先細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞團(tuán)，稱之為集落。腫瘤細(xì)胞能無(wú)限繁殖，所以具有這種能力，而成熟分化的細(xì)胞則不能形成集落。
實(shí)驗(yàn)方法
- 基本方案
| 實(shí)驗(yàn)方法原理 | HL-60細(xì)胞是一種急性早幼粒細(xì)胞白血病細(xì)胞，在體外無(wú)需加刺激因子，可在軟瓊脂培養(yǎng)基中形成集落。二甲基亞砜是一種細(xì)胞分化誘導(dǎo)劑，經(jīng)二甲基亞砜處理后的HL-60細(xì)胞按粒系途徑定向成熟分化，同時(shí)細(xì)胞的增殖力降低，幾乎全部細(xì)胞喪失了軟瓊脂中形成集落的能力。因此，這種方法可用于細(xì)胞分化的基礎(chǔ)研究和臨床腫瘤治療的療效檢驗(yàn)等方面。 |
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| 實(shí)驗(yàn)材料 | HL-60細(xì)胞 |
| 試劑、試劑盒 | 小牛血清 RPMI1640培養(yǎng)液 臺(tái)盼蘭 瓊脂 二甲基亞砜 |
| 儀器、耗材 | 超凈工作臺(tái) 二氧化碳培養(yǎng)箱 顯微鏡 培養(yǎng)瓶 吸管 酒精燈 血細(xì)胞計(jì)數(shù)板 多孔培養(yǎng)板 |
| 實(shí)驗(yàn)步驟 | 1. 收集對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的HL-60細(xì)胞，先按實(shí)驗(yàn)十三測(cè)定細(xì)胞活力，然后調(diào)整細(xì)胞濃度，制成300~1 000活細(xì)胞/ml 的細(xì)胞懸液。
6. 然后移培養(yǎng)板或平皿于CO2培養(yǎng)箱中37℃進(jìn)行培養(yǎng)。
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