生物化學技術(shù)專題：強心苷的鑒別
更新時間：2014-01-14 瀏覽次數(shù)：1234
1．檢品溶液的制備：
取夾竹桃葉碎塊粉末3g，于100ml錐形瓶中加70%乙醇40ml，水浴上浸煮5分鐘，放冷，過濾，濾液（或經(jīng)處理后--方法參照注二）供鑒別用。
[注1]：強心苷的試驗都是在較強的堿性條件下進行，如果樣品中含有蒽醌，也具有紅色反應(yīng)，防礙檢查，因此在檢查前需先檢查有無蒽醌類成分，若有則應(yīng)先將其除去，即將乙醇浸液在水浴上蒸發(fā)，殘渣加CHCl3熱溶后過濾，CHCl3液用1%NaOH液振搖，去除蒽醌后，CHCl3液供鑒別用。
[注2]：夾竹桃葉或毛地黃葉綠素，常使醇提液帶較深的綠色，影響反應(yīng)的進行。故需將葉綠素除去，具體方法如下：
乙醇浸提液在水浴上揮去大部分乙醇（不讓乙醇揮盡），再加水適量，使含醇量約20%左右，稍熱后即放冷，過濾，濾液即可供試驗用，或?qū)V液在水浴上濃縮至糖漿狀，加入95%乙醇10ml溶解再供試驗用。
2．鑒別試驗：
（1）三氯化鐵冰醋酸反應(yīng)（Keller-Kiliani反應(yīng)）：取醇提液或經(jīng)處理后的CHCl3或醇液1ml，水浴上蒸干，殘渣溶于冰醋酸2ml中，加入1%FeCl3乙醇液1滴，混合均勻，傾入干燥小試管中，再沿管壁緩慢加入等體積濃硫酸，靜置，二液交界處顯棕色（苷元），漸變?yōu)闇\綠，蘭色，zui后上面醋酸層全呈蘭色或蘭綠色（ -去氧糖）。
（2）堿性3.5-*甲酸反應(yīng)（Kedde反應(yīng)）：取1ml醇浸提液，加入堿性3.5-二硝苯甲酸試劑3~4滴，產(chǎn)和紅色或紅紫色反應(yīng)。
（3）亞硝酰鐵氰反應(yīng)（Legal反應(yīng)）：取1ml醇浸提液或經(jīng)處理后的CHCl3或醇液在水浴上蒸干，用1ml吡淀溶解殘渣，加入0.3%亞硝酰鐵溶液4~5滴，混勻，再加入NaOH飽和乙醇液1-2滴，是否呈現(xiàn)紅色（若結(jié)果不明顯可另一取一份供試液如上操作，zui后加NaOH飽和乙醇液0-5ml，觀察二液交界面有無紅色）。
（4）堿性苦味酸（Baljet反應(yīng)）
取樣品醇液1ml，加入堿性苦味酸試劑（苦味酸飽和水液與5%NaOH水液等量混合）數(shù)滴，呈現(xiàn)橙或橙紅色。
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