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技術(shù)文章

Microbiologics公司推薦的各菌種的生長條件

更新時間:2013-03-09 瀏覽次數(shù):4746

 

推薦生長條件
(適用于KWKK-STIK 和LYFO DISK 產(chǎn)品)
 
如何選擇的菌種生長條件
 
1.         zui初的生長是在非選擇性瓊脂培養(yǎng)基上。除非特殊情況或特別推薦,zui初的生長一般不考慮液體培養(yǎng)基。這是由于在液體培養(yǎng)基中獲得凍干菌株的純種比較困難,污染所帶來的雜菌可能會過度生長,影響得到目標(biāo)菌株的純種。
 
2.         以下列出可供選擇的瓊脂培養(yǎng)基和相應(yīng)的生長條件,供各實驗室培養(yǎng)菌種時參考。
 
方法 1
ü       胰蛋白胨大豆瓊脂,非選擇性羊血瓊脂,標(biāo)準計數(shù)平板,或營養(yǎng)瓊脂-----35,正常環(huán)境,24-48小時。
方法 2
ü         非選擇性羊血瓊脂----- 35,正常環(huán)境,24-48小時。
方法 3
ü         巧克力瓊脂(含血紅蛋白和NAD)-----35,5%-10% CO2環(huán)境,24-48小時。
方法 4
ü         厭氧血瓊脂-----35℃,厭氧環(huán)境,48-72小時;
ü         部分專性厭氧菌可能需要5-7天,才能充分生長;
ü         對于梭菌,以下新鮮配制的平板也可選用:營養(yǎng)瓊脂,胰蛋白胨大豆瓊脂和標(biāo)準平板計數(shù)瓊脂(標(biāo)準方法瓊脂);只是需額外培養(yǎng)24小時。
方法 5
ü         沙保氏葡萄糖Emmons瓊脂-----25正常環(huán)境,2-7天;
ü         沙保氏葡萄糖瓊脂-----25,正常環(huán)境,2-7天;
ü         非選擇性羊血瓊脂也可選用;
ü         以下培養(yǎng)基也可選用:營養(yǎng)瓊脂,胰蛋白胨大豆瓊脂,馬鈴薯葡萄糖瓊脂和標(biāo)準平板計數(shù)瓊脂,只是需額外培養(yǎng)24小時。
方法 6
ü         巧克力瓊脂(含血紅蛋白和NAD)-----35,微需氧環(huán)境,48-72小時。
方法 7
ü         Lowenstein Jensen瓊脂或Middlebrook瓊脂-----35℃,5%-10% CO2環(huán)境或正常環(huán)境,7天。
 
 
 
方法 8
ü         緩沖活性炭酵母提取物瓊脂-----35℃,正常環(huán)境,3-5天。
方法 9
ü         V 瓊脂或巧克力瓊脂-----35℃,5%-10% CO2環(huán)境,48小時。
方法 10
ü         腦心浸出液肉湯,胰蛋白胨大豆肉湯,或0.85%生理鹽水均可選用。
ü         非選擇性羊血瓊脂或胰蛋白胨大豆瓊脂-----35℃,正常環(huán)境,24-48小時。
方法 11
ü         先接種于MRS肉湯中-----35℃,正常環(huán)境,48小時;
然后接入含羊血的哥倫比亞CNA培養(yǎng)基中-----35℃,5% CO2環(huán)境,48小時。
方法 12
ü         馬鈴薯葡萄糖瓊脂-----45℃,正常環(huán)境,48-72小時。
方法 13
ü         取一顆凍干顆粒于10 B 精氨酸肉湯中,若是KWIKSTIK則溶于自帶的培養(yǎng)基中。作系列梯度稀釋(例如,1:10,1:100,1:1000,1:10000)。在35℃下,正常環(huán)境中培養(yǎng)。精氨酸瓶中液體一旦變成粉紅色(24-48小時),轉(zhuǎn)接0.1 mL到A-8瓊脂,劃線分離。人型支原體,35℃,5-10%CO2環(huán)境;解脲支原體,35℃,厭氧環(huán)境,培養(yǎng)96個小時。使用顯微鏡觀察平板菌落。
方法14
ü         取一顆凍干顆粒于SP4葡萄糖肉湯中,若是KWIKSTIK則溶于自帶的培養(yǎng)基中。作系列梯度稀釋(例如,1:2,1:4,1:8,1:16,1:32)。在35℃下,正常環(huán)境中培養(yǎng)。一旦肉湯從紅色變成黃色(1-4周),轉(zhuǎn)接0.2 mL到SP4葡萄糖瓊脂,劃線分離。不要使用棉質(zhì)拭子或木質(zhì)棒。35℃,CO2環(huán)境中,可以使用燭缸,培養(yǎng)5-15天。使用顯微鏡觀察平板菌落。
方法15
ü         取一顆凍干顆粒于10 B 精氨酸肉湯中,若是KWIKSTIK則溶于自帶的培養(yǎng)基中。作系列梯度稀釋(例如,1:10,1:100,1:1000)。在35℃下,正常環(huán)境中培養(yǎng)。一旦肉湯從黃色變成粉紅色(48-72個小時),轉(zhuǎn)接0.2 mL到SP4葡萄糖瓊脂,劃線分離。不要使用棉棒或者木質(zhì)棒,將平板至于35℃厭氧環(huán)境中培養(yǎng)3-6天。使用顯微鏡觀察平板菌落。
方法16
ü         Leeming Notman瓊脂,30℃下,正常環(huán)境中培養(yǎng)72個小時。
 
各類菌株的推薦培養(yǎng)方法如下: 
  
                                             
Acinetobacter sp.
不動桿菌屬
方法1
Acetobacter sp.
醋桿菌屬
方法3
注:25℃培養(yǎng)3-4天。
 
 
Actinobacillus sp.
放線桿菌屬 
方法3
Actinomyces sp.
放線菌屬
方法4
Aerococcus sp.
氣球菌屬
方法1
Aeromonas sp.
氣單胞菌屬
方法2
注:Aeromonas hydrophila (嗜水氣單胞菌應(yīng)在30培養(yǎng)。Aeromonas salmonicida(殺鮭氣單胞菌應(yīng)在25培養(yǎng)。
Alcaligenes  sp.
產(chǎn)堿桿菌 
方法1
Alicyclobacillus sp.
脂環(huán)酸芽孢桿菌

 
方法12

Alloiococcus sp. Method 2
 
 

 

Aneurinibacillus sp.
硫胺素芽孢桿菌屬
方法1
Aquaspirillum sp.
水螺菌屬
方法1
注:25℃培養(yǎng)6天。
 
 
Arcanobacterium sp.
隱秘桿菌屬
方法2
Arthrobacter sp.
節(jié)桿菌屬
方法1

 
注:25℃培養(yǎng)。

 
Aspergillus sp.

曲霉菌屬
方法5
Bacillus sp.
芽孢桿菌屬
方法1
注:一些芽孢桿菌屬經(jīng)證明在室溫下保存后的傳代恢復(fù)率高于在2-8中保存的。
Bacteroides sp.
擬桿菌屬
方法4

 
注:Bacteroides ureolyticus(解尿素擬桿菌應(yīng)培養(yǎng)5天,菌落很小。有時需要多傳1代以得到足夠的供試菌落。

Bifidobacterium sp.
雙岐桿菌屬
方法4
Bordela sp.
博德特氏菌屬
方法3
注:可能需要一周的培養(yǎng)時間;正常環(huán)境也可。
注:Bordela pertussis (百日咳桿菌) (MicroBioLogics 目錄號0843) 需添加了15%去纖維蛋白羊血的包姜氏(Bordet Gengou)培養(yǎng)基。
Brevibacillus sp.
短芽孢桿菌屬
方法1
Brevundimonas sp.
短波單胞菌屬

 
方法1

Brochothrix sp.
環(huán)絲菌屬
方法1
注:25℃培養(yǎng)。
 

 

Budvicia sp.
布戴約維采菌屬
方法1
注:25℃培養(yǎng)。
Burkholderia sp.
 伯克霍爾德菌屬

 
方法1

Campylobacter sp.
 彎曲桿菌屬
方法6

 
注:巧克力瓊脂是Campylobacter jejuni(空腸彎曲桿菌的zui適普遍生長培養(yǎng)基。在zui初的48小時培養(yǎng)期內(nèi)不要揭開接過種的平皿。

Candida sp.
念珠菌屬
方法5
Capnocytophaga sp.
噬二氧化碳菌屬
方法3
Cellulosimicrobium sp.
纖維微細菌
方法1
Chryseobacterium sp.
金黃桿菌屬
方法1
Citrobacter sp.
檸檬酸桿菌屬
方法1
Cladosporium sp.
枝孢霉屬
方法5
Clostridium sp.
梭菌屬
方法4
注:Clostridium baratii(巴氏梭菌只在厭氧血平板上生長。
Corynebacterium sp.
棒桿菌屬
方法1
Cryptococcus sp.
隱球菌屬
方法5
注:Cryptococcus(隱球菌)需在25℃培養(yǎng)。
Deinococcus sp.
異常球菌屬
方法1
Delftia sp.
代爾夫特菌屬
方法1
Edwardsiella sp.
愛德華菌屬
方法1
Eggerthella sp.
埃格特菌
方法4
Eikenella sp.
埃肯菌屬
方法3
Enterobacter sp.
腸道菌屬
方法1
Enterococcus sp.
腸球菌屬
方法1
Erysipelothrix sp.
丹毒絲菌屬
方法2
Escherichia coli
大腸桿菌
方法1
Exiguobacterium sp.
微小桿菌屬
方法1
Finegoldia sp.
芬戈爾德菌
方法4
注:厭氧環(huán)境中培養(yǎng)72-96小時。
Flavobacterium sp.       產(chǎn)黃菌屬
方法1
注:30℃培養(yǎng)。
Fluoribacter sp.
熒光桿菌屬
方法8
Fusarium sp.
鐮刀菌屬
方法5
Fusobacterium sp.
梭桿菌屬
方法4
Gardnerella sp.
加德納氏菌屬
方法9
Gemella sp.
兼性雙球菌屬
方法4
Geobacillus sp.
地芽孢桿菌屬
方法1
注:Geobacillus stearothemophilus (嗜熱脂肪地芽孢桿菌需在55℃培養(yǎng)。Geobacillus stearothemophilus,MBL貨號為0137,在羊血瓊脂上不能生長。
Geotrichum sp.
地絲菌屬
方法5
Haemophilus sp.
嗜血桿菌屬
方法3
Hafnia sp.
哈夫尼菌屬
方法1
Issatchenkia sp.
伊薩酵母屬
方法5
Kingella sp.
金氏桿菌屬
方法2
注:5-10% CO2 環(huán)境下培養(yǎng)。
Klebsiella sp.
克雷伯氏菌屬 
方法1
Kloeckera sp.
克勒克酵母屬
方法5
Kocuria sp.
庫克菌屬
方法1
K.糠疹應(yīng)在25℃培養(yǎng)。
Lactobacillus sp.
乳酸桿菌 
方法2
注:L. acidophilus (嗜酸乳桿菌), L. casei (干酪乳桿菌), L. delbrueckii (德氏乳桿菌L.gasseri (加氏乳桿菌需用方法11。
Lactococcus sp.
乳球菌屬
方法2
Leclercia sp.
勒克菌屬
方法1
Legionella sp.
軍團菌屬
方法8

 
Listeria sp.

李斯特菌屬
方法1
Macrococcus sp.
巨型球菌屬
方法1
Malassezia sp.
馬拉色氏霉菌屬
方法16
Mannheimia sp.
曼海姆菌
方法1
Methylobacterium sp.
甲基桿菌屬
方法1
注:25℃培養(yǎng)。在標(biāo)準平板計數(shù)瓊脂上生長。
Microbacterium sp.
桿菌屬
方法1
注:30℃培養(yǎng)。
 
 
Micrococcus sp.
微球菌屬
方法1
注:胰蛋白胨大豆瓊脂或非選擇性的羊血瓊脂對于貨號03370689是的生長培養(yǎng)基。
Micromonas sp.
微單胞菌屬
方法4
注:Micromonas Micros(微小微單胞菌需在厭氧環(huán)境中培養(yǎng)5-7天。
Microsporum sp.
小孢菌屬
方法5
Microsporum canis(犬小孢子菌)在沙保氏葡萄糖瓊脂上生長困難。
Moraxella sp.
莫拉菌屬

 
方法2

Morganella sp.
摩根菌屬
方法1
Mycobacterium sp.
分枝桿菌屬
方法7

 
注:Mycobacterium gordonae (戈氏分枝桿菌), Mycobacterium terrae (地分枝桿菌Mycobacterium Tuberculosis (結(jié)核病分枝桿菌可能需要一個月的培養(yǎng)時間。

支原體屬
注: Mycoplasma hominis(人型支原體)必須按照方法13。Mycoplasma orale(口腔支原體)必須按照方法15Mycoplasma pneumoniae(肺炎支原體)必須按照方法14.

 
Myroides sp.

香味菌
方法 2
Neisseria sp.
奈瑟菌屬
方法 3
注:巧克力平板是Neisseria sp.(奈瑟菌的zui適普遍生長培養(yǎng)基。在zui初的48小時培養(yǎng)期內(nèi)不要揭開接過種的平皿。
Nocardia sp.
諾卡氏菌屬
方法1
Novosphingobium sp.
鞘脂單胞菌屬
方法1

 
注:25℃培養(yǎng)。

 
 
Ochrobactrum sp.
蒼白桿菌
方法1

 
Oligella sp.

寡源桿菌屬
方法2
Paecilomyces sp.
擬青霉屬
方法5
Paenibacillus sp.
類芽胞桿菌屬
方法1
Parabacteroides
 
方法4
Pasteurella sp.
巴斯德菌屬
方法2
Pediococcus sp.
片球菌屬
方法11
注:Pediococcus damnosus(有害片球菌需從MRS肉湯轉(zhuǎn)入MRS瓊脂上次代培養(yǎng),需在25℃培養(yǎng)。
Penicillium sp.
青霉菌屬

 
方法5

Peptoniphilus sp.
嗜胨菌
方法4
注:在厭氧環(huán)境中培養(yǎng)72-96小時。
Peptostreptococcus sp.
消化鏈球菌屬
方法4
Plesiomonas sp.
毗鄰單胞菌屬
方法1
Porphyromonas sp.
卟啉菌屬
方法4
注:需在厭氧環(huán)境培養(yǎng)5-7天。
Prevola sp.
普雷沃菌屬
方法4
注:需在厭氧環(huán)境培養(yǎng)5-7天。
Propionibacterium sp.
丙酸菌屬
方法4
注:需在厭氧環(huán)境培養(yǎng)3-5天。
Proteus sp
變形菌屬
方法1
Prototheca sp.
原壁菌屬
方法5
Providencia sp.
普羅威登斯菌屬
方法1
Pseudomonas sp.
假單胞菌屬
方法1
注:Pseudmonas fluorescens(熒光假單胞菌應(yīng)在25℃培養(yǎng),假單胞菌屬(MicroBioLogics 目錄號0162) 應(yīng)在30℃培養(yǎng)。
Ralstonia sp.
雷爾氏菌
方法1
Raoulla sp.
拉烏爾菌
方法1
Rhizopus sp.
根霉菌屬
方法5
Rhodococcus sp.
紅球菌屬
方法2
Rhodotorula sp.
紅酵母屬
方法5
Saccharomyces sp.
酵母菌屬
方法5
注:沙保氏葡萄糖瓊脂和沙保氏葡萄糖Emmons 瓊脂是Saccharomyces sp.(酵母菌屬)生長的zui適培養(yǎng)基。
Salmonella sp.
沙門氏菌屬         方法1
Scopulariopsis sp., ,
帚霉屬
方法5
Serratia sp.
粘質(zhì)沙雷菌
方法1
Shewanella sp.
希瓦氏菌屬
方法10
Shigella sp.
志賀菌屬
方法1
Sordaria sp.
糞殼菌屬
方法5
Sordaria sp.(糞殼菌屬)在沙保氏葡萄糖Emmons 瓊脂上比在沙保氏葡萄糖瓊脂上更易形成孢子。
Sphingobacterium sp.
鞘氨醇桿菌屬
方法1
Sphingomonas sp.
鞘氨醇單胞菌屬
方法1
注:25℃培養(yǎng)。
 
 
Staphylococcus sp.
葡萄球菌屬
方法1
注:對于金黃色葡萄球菌,MBL貨號為0158,對萬古霉素的耐受力隨著菌齡、培養(yǎng)基種類、傳代數(shù)變化而降低,傳菌zui適是在腦心浸出液瓊脂中加入4 mg/L萬古霉素。
Stenotrophomonas sp.
寡養(yǎng)單胞菌
方法1
Streptococcus sp.
鏈球菌屬
方法2
注:Streptococcus cricetus(大鼠鏈球菌應(yīng)在微需氧環(huán)境培養(yǎng)。Streptococcus sp.(鏈球菌屬)(MicroBioLogics貨號 #0978) 應(yīng)在CO2中生長。
Streptomyces sp.
鏈霉菌屬
方法5

 
注:Streptomyces sp.(鏈霉菌屬)不能在馬鈴薯葡萄糖瓊脂上生長。

Thermoanaerobacterium sp.
高溫厭氧芽孢桿菌屬
方法4
注:T. thermosaccharolyticum (嗜熱細菌熱解糖熱厭氧桿菌,MicroBioLogics目錄號0728) 的zui初生長培養(yǎng)基應(yīng)為庖肉培養(yǎng)基。45° C,培養(yǎng)72小時。然后接種至厭氧血平板上培養(yǎng),45° C,72 小時,厭氧環(huán)境培養(yǎng)。
Trichophyton sp.
發(fā)癬菌屬
方法5
Trichosporon sp.
毛孢子菌屬
方法5
Ureaplasma sp.
脲原體屬
方法13
Veillonella sp.
韋榮球菌屬
方法4
Vibrio sp.
弧菌屬
方法10
注:Vibrio alginolyticus(溶藻弧菌應(yīng)在哥倫比亞血瓊脂或胰蛋白胨大豆瓊脂上培養(yǎng)。
Virgibacillus sp.
枝芽孢菌屬
方法1
Yarrowia sp.
亞羅酵母屬
方法5
Yersinia sp.
耶爾森菌屬
方法1
Zygosaccharomyces sp.
接合酵母屬
方法5
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